程颖：气化细胞在小细胞肺癌临床研究中的进展

反向线粒体( Circulating tumor cells，CTCs)作为一种可替代原发的“液体活检化石”，已在移转到开放性乳肝癌、癌和结直肠癌当中用于结节病高度评价。小线粒体癌症(Small celllung cancer，SCLC)组织化石是从不足，且忽视有效的追踪病情恶化移转到和预见结节病的有机体研究课题。近年来比对者CTCs在SCLC当中的病理相当多应用进行了聚焦开放性比对，发掘出CTCs对SCLC的病理、有系统，追踪病情恶化、移转到，指标、结节病以及建立形体病人设计方案等有着重要内涵，本文就CTCs在SCLC病理相当多应用当中的比对进展给与综述。

一、SCLC病人CTCs的检验方式

CTCs的检验方式主要有流式线粒体检验技术( fluocytometry，FCM)、逆转录一聚合酶链反应(reverse-transcriptionPCR，RT-PCR)、CellSearch系统、CTC芯片(CTC-chip)技术和膜滤过除去线粒体技术(isolation by size of epithelial tumor cells．ISET)等，其当中CellSearch系统因其半自动化的操作平台，很低的特异开放性、敏感开放性和可重复开放性，带进最常相当多应用的CTCs检验方式。

早在2004年，Allard等率先相当多应用CelISearch法律条文检验了99举例癌症（未列举SCLC举例数）病人的CTCs，随后Nagrath等采用CTC-chip法律条文检验了55举例癌症病人则有鲜血C TCs。2009年以后的比对多采用CeIISearch法律条文检验SCI．C病人则有鲜血CTCs，然而该方式由于对忽视上皮线粒体特征的线粒体会消失漏检可能，且与免疫磁珠及抗体紧密结合的CTCs不易律条文行某些早先的检验，病理相当多应用受到局限。

近年来，随着纳米科技的蓬勃发展，特异开放性CTCs表面研究课题的特异开放性识别分f修饰的纳米材料紧密结合微流控技术的CTCs检验平台的比对受到相当多关切，2013年，《纯净》（Nature）杂志将CTCs纳米检验选为最具创新开放性和升华吸引力的病理新方式，成果功不可没有人。但就目前来看，现有的CTCs检验方式各有利弊，未有比对断定哪种方式对SCLC的CTCs检验更是有优势。着眼今后，亟需要研发特异开放性、敏感开放性更是高的CTCs检验技术，为SCLC的典范和病理比对造就打破。

二、CTCs在SCLC病理相当多应用当中的比对现状

（一）CTCs除此以外与SCLC的病理、有系统

近年来多项比对辨识CTCs除此以外程度与SCLC的病理、有系统有紧密联系0 2009年Tanaka等相当多应用CeIISearch法律条文检验了1 50举例7.5ml则有鲜血CTCs，其当中癌症1 25举例、非恶开放性25举例，癌症病人包含116举例非小线粒体癌症(non-small cell lung cancer，NSCLC)和9举例SCLC。

比对结果指出SCLC病人CTCs阳开放性率为66.70-/0（6举例／9举例），显着少于NSCLC病人的CTCs阳开放性率(肝癌25.9%，鳞癌40.9%；肝癌对比SCLC，P

月底，Hou等相当多应用CeIISearch法律条文检验了50举例初治的SCLC病人则有鲜血CTCs，包含20举例局限期SCLC (limited disease，LD-SCLC)病人和30举例相当多期SCLC(extensive disease，ED-SCLC)病人，孔径期ED-SCLC及LD-SCLC病人的当中位CTCs除此以外计有237和2个/7.5ml鲜血，7举例未检出CTCs的病人均为LD-SCLC，假定CTCs除此以外程度与SCLC有系统特别。

近似于的结论在2012年被日本人学时者Naito等断定，比对者在51举例SCLC病人当中立用CeIISearch法律条文检验孔径期CTCs程度，结果指出ED-SCLC,病人的当中位CTCs除此以外为9.5个f 7.5ml鲜血，而LD-SCLC仅为1个／7.51111鲜血，促使假定ED-SCLC病人的CTCs程度少于LD-SCLC病人。

（二）CTCs指标SCLC的及结节病

CTCs是否可作为指标SCLC和结节病的有救指f,匙比对者们依然在探讨的原因。Houi等在2009年通过CellSearch法律条文检验了50举例SCLC病人(LD-SCLC20举例，ED-SCLC30举例)的CTCs，发掘出CTCs>300个/7.5ml鲜血的病人及CTCs

孔径期CTCs>=50和

在该比对当中SCLC病人的结节病就其差值基本上8个/7.5ml鲜血，以此将病人分为CTCs>=8及

Hiltermann等在2012年同样相当多应用CellSearch法律条文检验59举例SCLC病人在孔径期、1周期抗生素后及4周期抗生素结束后外固鲜血CTCs程度，其当中ED-SCLC病人38举例，LD-SCLC病人2 1举例c孔径期有43举例病人(730-/o)CTCs≥2个/7.5ml鲜血，CTCs>215个/7.5ml鲜血和CTCs

经过1周期抗生素后病人CTCs程度有所提升，且1周期抗生素后CTCs

比对者推断CTCs程度是SCLC结节病的独立影响表征，其当中1周期抗生素后CTCs程度是SCLC和结节病旗鼓相当的预见表征。

2013年ASCO发表的ECOG1508比对当中，比对者尝试在155举例ED-SCLC当中加入特异开放性病人，并对其当中123举例病人孔径期CTCs进行检验，结果指出特异开放性病人未能延长ED-SCLC病人的PFS和OS，但发掘出孔径期CTCs≤l00和CTCs>100个／7.5ml鲜血的mPFS计有4.4和4.3个月（P=0.07），OS计有10.7和7.2个月(P=0.01)。比对者并不认为虽然特异开放性病人没有人能提升ED-SCLC病人的PFS和OS，但却发掘出了CTCs可能是SCLC病人的结节病研究课题。

差值得注意，Igawa等尝试相当多应用OBP-401试验检验SCLC病人则有鲜血CTCso相当多应用OBP-401试验检验乳肝癌和胃癌病人CTCs的特别比对已为前期华盛顿邮报。比对纳入30举例韧治的SCLC病人，29举例病人(96%)则有鲜血CTCs阳开放性。在孔径期，21举例病人CTCs

（三）CTCs追踪SCLC的病情恶化和移转到

现有的比对指出通过检验CTCs的消失来追踪SCLC的病情恶化和移转到有着重要的病理内涵o Tanaka等比对发掘出CTCs程度‘j 125举例癌症病人（包含9举例SCLC病人）进展显着特别，特别是与近处移转到紧密（AUC-ROC 0,873 p

基于这些数据，作者并不认为CTCs可作为追踪癌症近处移转到的有机体标记物。Natio等比对发掘出SCLC在孔径期、病人结束后及病情恶化后CTCs的阳开放性率计有68.6%、26.5%和67.6，定时SCLC病情恶化后则有学时CTCs程度下降时，发生近处移转到脏器的为数为0、1和>=2的病人其当中位CTCs除此以外计有2.0、7.5和21个/7.5ml鲜血,定时CTCs程度与近处移转到脏器的为数有关，近处移转到越多，CTCs除此以外越（p

三、CTCs在SCLC病理相当多应用当中的聚焦顺时针

病情恶化和移转到是引致病人病人失败和致死的主要缘故，立刻发掘出的病情恶化和移转到并采敢积极有效的病人措施可突出提升病人生存率。然而，由于SCLC忽视需要追踪病情恶化和移转到的有机体研究课题，且常规影像学时检验不易律条文发掘出微移转到灶及微小受到破坏肿病变，引致发生病情恶化和移转到的SCLC病人不能立刻接受病理和病人。

病理当中以外LD-SCLC的病人结节病差别更是大，定时有些局限期的病人在病理时可能已发生了影像学时不能发掘出的微移转到而带进潜在的相当多期病人。通过检验则有鲜血CTCs的消失及为数发生变化从而对SCLC病人人体内正常进行实时、动态地追踪和高度评价，立刻发掘出的病情恶化、移转到，将有助于病理医师对病人时机的把握和病人策略的选择，但究竟CTCs的为数或发生变化差值为多少时需要精确反映SCLC的病情恶化或移转到尚不明确，需要要更是多的循证医学时证据给与支持。

CTCs在指标SCLC病人病人全面开放性的相当多应用尚位处聚焦前期，病人流程当中CTCs为数的发生变化与SCLC病人抗生素的特别开放性及其与SCLC病人放疗时机的选择等原因在今后需要大量的病理比对。近5年，对CTCs是否可作为SCLC病人结节病指标的比对日渐增加，但SCLC最佳的结节病CTCs就其差值尚无确切，争议颇多。

其当中3项来自Hou、Naito、Hiltermann的比对将SCLC的结节病CTCs畀定差值分别基本上为50、8和2个／7.5ml鲜血，差别很大，这可能与比对采用的统计学时方式不尽相同以及入组样本量较少有关。全面开放性意大利学时者Normanno等主张将ED-SCLC和LD-SCLC病人分开比对，对孔径期、l周期抗生素后CTCs以及病人前后CTCs的发生变化差值分别基本上结节病就其差值，为今后的比对缺少了新的思路。外间所在的科研团队也正倡导我国SCLC病人结节病最佳CTCs就其差值的比对，结果令人期盼。

的形体病人是病人模式的蓬勃发展顺时针。SCLC病人对抗生素制剂的反应存在显着的相异，其主要缘故可能与繁杂的异质开放性、基因表达差别及近似于开放性有关。所以，逐步明晰SCLC的蛋白质组学时特征对借助真正内涵上的SCLC形体病人尤为重要。全面开放性我国学时者王洁等比对人员通过相当多应用单线粒体基因测序手段对病人单个CTC进行全线粒体、外显子线粒体测序。

在此项比对当中，谢晓亮教授发明的多重碳化和环化反向的缩减技术(MAIBAC)，取得成功借助了对病人则有鲜血单个CTC的全线粒体缩减和厚度测序，在单个线粒体程度探测器全线粒体基因拷贝数变异(CNVs)和单核苷酸变异(SNVs)o单线粒体程度CTCs线粒体测序技术可立刻缺少如耐药基因突变等形体病人所需要的重要信息，同时也为今后SCLC特异开放性制剂的研发缺少技术支持。

SCLC组织化石不易获取，限制了早先各项检验比对的组织起来，而利用CTCs框架的SCLC反向线粒体复制病变( CTC-derived explants，CDXs)模型，下半年消除这一困难重重难题。差值得注意，Hodgkinson等尝试将6举例ED-SCLC病人lOml则有鲜血当中的CTCs除去出后切除到水痘小鼠表皮，结果在4只小鼠身上过渡到了CDXs，假定SCLC病人的CTCs有着致病变开放性。

同时相当多应用CelISearch法律条文检验这6举例SCLC病人的CTCs，结果指出取得成功过渡到CDXs的4举例病人的CTCs除此以外均>400个／7.5ml鲜血，而另外2举例未过渡到CDXs的病人其CTCs除此以外计有222和20个／7.5ml鲜血，定时SCLC的CTCs致病变开放性与则有鲜血CTCs教量有关。促使比对发掘出相较于抗生素敏感开放性SCLC，抗生素耐药开放性SCLC病人的CDXs愈来愈多等待时间短、土壤更是迅速。对3举例CDXs给予顺铂和依托泊苷抗生素制剂，其敏感开放性依次为CDX3>CDX2>CDX4，相应病人的OS计有9.7.3.5.0.9个月，定时对CDXs进行肾脏药敏试验可以间接反应病人生存等待时间。

该比对辨识以外SCLC的则有鲜血CTCs有着干线粒体特开放性，可进行肾脏培育、过渡到与原发高度近似于的CDXs，为SCLC病人的肾脏药敏试验、耐药有助于比对等一系列检验比对缺少了发挥作用的组织，消除了SCLC病人化石是从不足的原因。

结论

从现行的比对可以看出，虽然CTCs在SCLC当中的病理相当多应用仍位处聚焦前期，但前景广阔。目前，诸多升华开放性比对正在进行当中，并不认为随着比对的不断深入，CTCs下半年带进SCLC的打破口，期盼CTCs在SCLC的领域当中为我们造就惊喜。

编辑： 雪